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其它菌类检测试剂盒
2012/4/11 11:44:21作者:金剑 摘自:菌类 检测试剂盒 试剂盒 编辑:鲍泽民
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一、检测试剂盒

1.伏马菌素B1试剂盒
本测试盒用间接竞争免疫分析法定量测定玉米中的伏马菌素B1(FB1)。该测试盒反应孔可拆卸,可测单份样品,也可测多份样品,定量分析时需有微孔板酶标仪。

概要
FB1是由串珠镰刀菌产生的真菌毒素,主要污染玉米及其制品。可诱发马的脑白质软化症和猪的肺水肿综合症。FB1对多种动物有肾脏毒性、肝脏毒性作用,对大鼠肝细胞和鸡巨噬细胞有细胞毒性。据报道,FB1与食管癌发病率有明显相关性,国际癌症研究中心把FB1划分到2B组,即人类可能的致癌物。因此FB1对人类健康和畜牧业发展构成潜在威胁,成为继黄曲霉毒素后的又一个研究热点。
目前检测粮食和饲料中FB1的仪器方法有液相色谱、气相色谱、质谱和毛细管电泳法等,这些方法灵敏度较高,结果稳定,但所需仪器设备昂贵,样品准备耗时长,不适于大量样品的筛选。本试剂盒是以应用单克隆抗体为基础的ELISA检测方法,可以准确快速检测玉米中的FB1。

测定原理
本试剂盒用固相酶联免疫吸附原理,利用间接竞争ELISA法进行测定。用抗原包被微孔板,加入FB1标准品或样品、FB1单克隆抗体进行孵育后,将未与包被抗原结合的抗体洗去;再加入酶标记的抗鼠IgG抗体(酶标物)孵育,加入显色液显色,经终止液终止后,用酶标仪在450nm处测定OD值。

提供的物品
微孔板
5个浓度的FB1标准溶液(各1mL)
标准1:0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
标准2:50ng/mL ……………………………………………………………直接使用
标准3:100ng/mL …………………………………………………………直接使用
标准4:200ng/mL …………………………………………………………直接使用
标准5:500ng/mL …………………………………………………………直接使用
FB1单克隆抗体溶液(6mL) ……………………………………………直接使用
酶标物(12mL) …………………………………………………………直接使用
显色液(12mL) …………………………………………………………直接使用
终止液(6mL) ……………………………………………………………直接使用
浓缩洗液(30mL) ………………………………………………………稀释使用
空白对照(6mL) …………………………………………………………直接使用

型号规格:96孔/盒

2.副溶血弧菌测试片
适用范围:用于各类食品和原料中副溶血弧菌的检测,以及突发事件应急检测需要。

方法原理:采用一种商品化的一次性培养基产品,含有高选择性培养基、吸水凝胶和特异酶指示剂等重要成分,培养15~24小时就可确认是否有副溶血弧菌的存在。

操作方法
A. 样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。
B. 接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。
C. 培 养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
D. 结果判别:呈紫红色的菌落为副溶血弧菌。多数非目的菌在测试片上不生长,少数能生长,如创伤弧菌和霍乱弧菌,但菌落呈蓝色,明显区别于目的菌。对于出现阳性菌落的样品,最好用其他方法作进一步的鉴定。

型号规格:24片/包

3.菌落总数测试片
适用范围:可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。

方法原理:将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色剂等加载在试纸片,经加样、培养后,细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑,通过计数报告结果。

操作方法
A. 样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇(均质)做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推,做出1:1000等稀释度的稀释液,每个稀释度更换一支灭菌吸管。
B. 接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的纸片上,轻轻将上盖膜放下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。
C. 培养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。

结果判断与计数:
细菌在纸片上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(10个~100个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时,按实有数报告。大于100时,用二位有效数字,二位有效数字后面的数字,以四舍五入方法计算,并以10的指数来表示。

计数原则与报告方式
通常选择菌落在10个~100个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之(见下表中例次1)。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mL,cfu的含义为菌落形成单位。
若有两个稀释度的菌落数在10个~100个之内,两者的比值小于2,则取其平均数,若大于2,则采用稀释度小者报告。
若三个稀释度的菌落数都有在10个~100个之内时,应选择二个低数值的平均数。
若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时,应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数;或采用均小于数量标准的最小值,或采用均大于数量标准的最大值。

表面取样方法:加1mL灭菌生理盐水在测试片上,静置至少1h使培养基凝固;提起上层膜,使中央滤纸部分贴到待测物表面,用手在外侧轻压;然后将上盖膜合上,置培养箱内培养。

型号规格:24片/包

二、霉菌、酵母菌测试片
霉菌、酵母菌测试片
适用范围:本品可用于各类食品及饮用水中霉菌和酵母菌的计数。

方法原理:将霉菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂加载在纸片上,通过培养,在酶显色剂的放大作用下,使霉菌和酵母菌在纸片上显现出出来,通过计数报告结果。

方法特点:与传统方法相比,省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,即开即用,操作简便。培养时间由一周缩短为48h~72h。

方法特点:与传统方法相比,省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,即开即用,操作简便。培养时间由一周缩短为48h~72h。

操作方法
A. 样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇做成1:10的稀释液,用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液,以此类推,每个稀释度更换一支灭菌吸管。
B. 接种:
一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5min,每个稀释度接种两片。
用手指先沿方格区边缘刮一下,防止水外流,然后再在中间轻轻推刮,使水分在纸片方格区内均匀分布,并将气泡赶走。
C. 培养:将加了样的检验纸片每12片叠放在一起,放入自封袋中,平放在28℃培养箱内培养48h开始观察计数。
D. 结果判断与计数:霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点,霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散,酵母菌落则较小而圆滑,许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中(10~50个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中霉菌和酵母菌的数目。

计数原则及报告方式:
通常选择菌落在10~50个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之。
具体计数原则可参照细菌(菌落)总数的测定方法进行。

型号规格:24片/包
本文关键词:菌类,检测试剂盒,速测盒
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