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沙氏门菌、大肠菌检测试剂盒
2012/4/11 11:33:43作者:金剑 摘自:金剑之光 编辑:鲍泽民
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1.阪崎肠杆菌测试片


适用范围:可用于各类食品和原料中阪崎肠杆菌菌的检测以及突发事件应急需要。

方法原理:测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品,由阪崎肠杆菌选择性培养基、吸水凝胶和特异性酶显色剂等组成,一步培养15~24小时就可确定出目标菌的存在。

操作方法
A.样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。
B.接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。
C.培 养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
D.结果判别: 对测试片进行观察,呈蓝绿色的菌落为阪崎肠杆菌。对于出现阳性菌落的样品,最好用其他方法作进一步的鉴定。

型号规格:24片/包

2.大肠菌和三种致病菌检测试剂盒


适用范围:适用于各类食品、纯净水等样品中大肠菌群数检测、致病菌(沙门氏菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌)的增菌检测。

方法原理:与国标法相同。事先将浓缩乳糖胆盐培养基、亚硒酸盐胱氨酸增菌液、GN增菌液、7.5%氯化钠培养基、包被在试剂盒中,随时取用。

试剂盒的组成:试剂盒由三个大发酵培养基管(孔)(1、2、3)、七个小发酵培养基管(孔)(4、5、6、7、8、9、10)和三个致病菌增菌培养基管(孔)(A、B、C)组成。1-10孔包被浓缩乳糖胆盐培养基,设有集气窗代替倒管观察产酸产气情况。A孔包被浓缩亚硒酸盐胱氨酸增菌液、B孔包被浓缩GN增菌液、C孔包被浓缩7.5%氯化钠培养基。A孔为沙门菌增菌,B孔为志贺菌增菌,C孔为金黄色葡萄球菌增菌。
操作方法:
A. 样品处理:按《食品卫生微生物学检验》GB/T4789.3.4.5.10-2003。
B.加样:将试剂盒放在台面上,打开盒盖,用无菌吸管吸取3个1:10稀释液10mL分别加入试剂盒3个大发酵培养基孔内,用无菌吸管吸取3个1mL分别加入试剂盒3小发酵培养基孔内。另用无菌吸管取1:10稀释后的样品1mL注入到9mL灭菌生理盐水中(1:100)取此管3个1mL稀释液加入到试剂盒另3个小发酵培养基孔内。另用无菌吸管吸取稀释后的样品3个4mL分别加入致病菌增菌管(孔)(A、B、C)孔内。
C.排气泡: 加样后集气窗内如有气泡存在,可将试剂盒以30~45度角倾斜,(图1)必要时可轻轻用力在桌面敲击数下即可排出集气窗内气泡。
D.培养:将加样后的试剂盒置36℃± 1℃温箱中,培养18~24h。
E.观察结果:样液变为黄色产酸、集气窗中有气泡产气,既产酸产气者为阳性。(图2、图3)产酸产气者进一步的检验参考GB/T4789.3-2003。根据试剂盒的阳性管数,参照国标GB/T4789.3-2003的方法查MPN检索表报告结果。如致病菌管(孔)浑浊,A孔转种沙门菌显色培养基或SS,B孔转种SS,C(孔)转种金黄色葡萄球菌显色培养基或血平皿。以下鉴定按GB/T4789.4.5.10操作。

型号规格:10份/盒

3.沙门氏菌测试片
沙门氏菌测试片

适用范围:可用于各类食品和原料中沙门氏菌的定性和初筛检测。以及突发事件应急检测需要。

方法原理:将选择性培养基中加入专一性的辛酯酶显色剂,并将其加载在纸片上,通过培养,如果样品中含有沙门氏菌,即可在纸片上呈紫红色的菌落。

操作方法
A.样品处理:无菌称取待测样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇或置均质器中做成1:10的样品匀液。
B.接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种两片。
C.培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,堆叠片数不超过12片,透明面朝上水平置于恒温培养箱内。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
D.结果观察:对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为沙门氏菌;呈蓝色的菌落为其他大肠菌,葡萄球菌不生长。

型号规格:24片/包

4.餐饮具用大肠群检测纸片
餐饮具用大肠群检测纸片
适用范围:适用于餐(饮)具、食品加工器具等表面卫生状况的测定。

采样:
A.随机抽取消毒后准备使用的各类食具(碗、盘、杯等),取样量可根据大、中、小不同饮食行业每次采样6件~10件,每件贴纸片两张,每张纸片面积25cm2(5cm╳5cm)。用无菌生理盐水湿润大肠菌群检测用纸片后,立即贴于食具内侧表面,30s后取下,置于无菌塑料袋内。
B.筷子以5只为一件样品,用灭菌1mL吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后,立即将筷子进口端(约5cm)抹试纸片,每件样品抹拭两张,放入无菌塑料袋内。

培养:将已采样的纸片置于37℃恒温培养箱中培养16 h~18h,取出观察结果。

结果判断:若纸片保持紫蓝色不变,或有红色斑点但斑点周围无黄晕者为大肠菌群阴性;在红色斑点周围有黄晕,或纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。国家标准规定:在50cm2的纸片上(即两片纸片上),大肠菌群不得检出。

型号规格:10份/包

5.大肠菌群大肠杆菌测试片(ECC)


原理及适用范围:大肠杆菌( Escherichia coli )和大肠菌群(Coliform)都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌,是条件性致病菌,主要造成水体污染,也可能引起食物中毒的发生。大肠杆菌大肠菌群测试片(E.coli / Coliform Count Plate BE203)是一种预先制备好的一次性培养基产品,可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群,含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶(GAL)和葡萄糖醛酸酶(GUD)指示剂。大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。

操作方法
A.样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,振摇后成为1:100的稀释液。
B.接种:一般食品选1~2个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将大肠杆菌大肠菌群测试片(BE203)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下,每个稀释度接种两片。

培养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。

结果判读: 培养后大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。选择有阳性菌落的最高稀释度的测试片进行计数,然后乘以稀释倍数即为样品中每毫升(克)含有大肠菌群数。

型号规格:24片/包

6.食品大肠菌群检测试剂盒(9管法)
食品大肠菌群检测试剂盒(9管法)
适用范围:适用于各类食品、纯净水等样品中大肠菌群数检测。

方法原理:与国标法相同。事先将浓缩乳糖胆盐培养基包被在试剂盒中,随时取用。

操作方法:
A.样品处理:按《食品卫生微生物学检验》GB/T4789.3-2003。
B. 加样:将试剂盒放在台面上,打开盒盖,以无菌手续分别取3个1:10稀释液10mL置试剂盒大孔中,分别取3个1mL置三个小孔中,取3个1:100稀释液1mL 置另三个小孔中。
C.排气泡: 加样后集气窗内如有气泡存在,可将试剂盒以30~45度角倾斜,必要时可轻轻用力在桌面敲击数下即可排出集气窗内气泡。
D.培养:将加样后的试剂盒置36℃± 1℃温箱中,培养18h~24h。
E. 观察结果:样液变为黄色、集气窗中有气泡产生时为阳性结果。参照国标GB/T4789.3-2003的方法查MPN检索表报告结果。

型号规格:10份/盒

7.大肠杆菌O157测试片


适用范围:用于各类食品以及人体体检样品中大肠杆菌O157:H7的检测。以及突发事件应急检测需要。

方法原理:采用选择性显色培养基作为主要原料,加入专一性酶显色剂,运用微生物测试片技术,做成一次性快速检验产品,通过接种、培养,如果样品中含有大肠杆菌O157:H7,即可在纸片上呈现紫红色的菌落。

操作方法
A.样品处理:无菌操作取25g(mL)样品放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成样品匀液,静置片刻。
B.接种:将测试片水平放在台面上,小心揭开上盖膜,用灭菌吸管吸取1 mL样品上清液或增菌液,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5min。每个样品接种两片。
C.培养:将加了样的测试片叠放在一起,放入原来的自封袋中,堆叠片数不超过12片,透明膜向上平放在37℃培养箱内培养15h~24h。
D.结果观察:对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为大肠杆菌O157:H7;呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。

型号规格:24片/包  

8.六种致病菌和大肠菌检测试剂盒


适用范围:本品适用于食品及水中致病性沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、致泻大肠埃希菌、腊样芽孢杆菌、板奇肠杆菌检测的前期增菌预实验观察以及大肠菌群污染程度的检测。

方法原理:依据国标GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技术将相对应培养基包被在试剂盒底部,随时取用。省去了实验前的大量准备工作,方便、快捷。

样品稀释:同国标法。固体或半固体样品用灭菌生理盐水配制成1:10和1:100的稀释液。液体样品取原液。

致病菌检测:
A.加样:用灭菌吸管吸取原液或1:10样品稀释液4ml~10 ml(不得少于4ml)分别加入到标号为1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)内。加样后的1、2、3号分别为副溶血弧菌、致泻大肠埃希菌、板奇肠杆菌增菌液;A、B、C分别为金黄色葡萄球菌、沙门菌、腊样芽孢杆菌增菌液。
B.培养:将加样后的试剂盒盖上盖,平放在36℃±1℃培养箱内培养6~18小时。
C.观察结果:如果某致病菌的增菌液发生浑浊,即预示含有此种致病菌。可将浑浊液接种于各相对应的选择性培养基上或接种于相对应的测试片上。置36℃±1℃培养箱内培养,18~24小时观察验证结果。

大肠菌检测
A. 加样:将试剂盒放在试验台面上,打开盒盖,用灭菌吸管分别吸取3个原液或1:10样品稀释液1ml加到标号为4、5、6的小培养基孔内。另用灭菌吸管分别吸取3个1:10或1:100的样品稀释液1ml加到标号为7、8、9的小培养基孔内,标号为10的小培养基孔内可加入1ml灭菌生理盐水作为培养基阴性对照孔使用。
B. 排气泡:加样后集气窗内如有气泡存在,可将试剂盒以30~45度角倾斜使气泡排出,必要时可轻轻用力在桌面上敲击数下排出气泡。
C. 培养:将加样后的试剂盒盖上盖,平放在36℃±1℃培养箱内培养18~24小时。
D. 观察结果:样液变为黄色为产酸、集气窗中有气泡为产气,产酸产气者为阳性结果,阳性结果的孔数越多,说明污染越严重。

型号规格:10套/盒

9.食品大肠菌群检测纸
食品大肠菌群检测纸

适用范围:适用于各类食品、原料和纯净水等样品中大肠菌群的快速测定。

方法原理:将乳糖、显色剂和选择性培养基加载在纸片上,经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性,记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。

方法特点:与国标法中的九管法相对应,将原来几步的试验简化为一步,时间由78h缩短为24h以内,省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,随时可以打开包装进行抽样检测。

操作方法
A. 样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL灭菌生理盐水的采样瓶或均质杯中,经充分振摇做成1:10的样品匀液,用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,振摇试管制成1:100的稀释液。以此类推,每个稀释度更换一支灭菌吸管。
B.  接种:选取两个稀释度进行接种,普通食品一般采用1:10和1:100这两个稀释度,饮料和饮用水采用原液和1:10两个稀释度。每份由三片大纸片(接10mL),六片小纸片(接1mL)组成,大片每小袋二张叠放算作一片。用灭菌吸管吸取10 mL 1:10稀释液加到含有大纸片的塑料袋中(相当于接样品1g),吸透后平放,做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1 mL同一稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.1g),做三个重复。再取一支1 mL灭菌吸管吸取1 mL 1:100稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.01g),做三个重复。
C. 培养:将接种好的纸片(可叠放)放入37°C培养箱中培养15h~24h。

结果判断与计数:若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。如接种的第一个稀释度的稀释液为原液,应将表上查出的结果除以10,以此类推。

型号规格:2份/包1

    
本文关键词:沙氏门菌,大肠菌,检测试剂盒
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